ISSR为什么扩增不出条带

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/06/17 22:03:03

ISSR为什么扩增不出条带
我现在做的是ISSR-PCR,体系都已经优化完成,曾经P出了较好的带,但是最近不知什么原因,好多时候都是白板无带,只有Marker很清晰.
25ul反应体系中,加入
模板DNA 1ul (5ng)
ISSR引物 1ul (约5pmol)
10xPCR Buffer 2.5ul 内含镁离子
dNTP 1ul （2.5mM）
Taq酶 1单位（U）
加ddH2O 至 25ul
PCR退火温度在48－56之间.Taq酶,dNTP是新的,模板也重新提过,跑总DNA条带也很亮,用的引物别人拿去可以扩增.我现在做大多数时候都是白板无带,我很郁闷,

可能是小问题导致,比方说你的EP管里是不是有杂质,你的加样枪是不是漏气什么的……实验做不出来就要怀疑一切,包括你的试剂是不是被别人动过了
建议同样的体系,请别人替你做一遍,看看能不能出来结果

基因的PCR扩增实验扩增不出DNA条带是什么原因? PCR扩增不出来条带的原因? 为什么我们做PCR扩增后条带出不来? mtDNA进行pcr扩增 25微升体系的电泳结果全部都出想要的一条亮带但是做了50微升体系的之后跑电泳许多不出条带最近做PCR扩增,用taq酶能扩出条带来,但是换成primerstar之后就一直出不了带,到底是什么原因? 同样的模板,只是引物不同扩增基因组上不同的片段,为什么条带亮度差别很大做逆转录PCR,扩增出的条带怎样区分是残留基因组DNA还是反转录得到的cDNA得到的结果【求助/交流】PCR扩增后没有条带是怎么回事? DNA PCR扩增我想问DNA样品检测中有很亮的特异性条带,但为什么经过PCR扩增却是什么都没有那,试过好多条件都没成功进行PCR扩增时为什么要将目的基因连到载体上?直接对其进行扩增不行吗? 转基因植物PCR检测,扩增条带比预期目的条带要大,对PCR扩增产物测序,结果与原序列比对同源性为60%,说明关于DNA半保留复制如果不是半保留,被标记的DNA怎样表示?表示不太明白为什么半保留就一定会出现三条带,而且是一个试管出