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TLC 和 HPLC结果 不一致

来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/04/27 17:32:05
TLC 和 HPLC结果 不一致
请问各位有没有遇到过这样的情况：有A和B两种物质,
TLC检测时在254nmUV条件下,B有很强的吸收,可是A几乎看不到,
可是在HPLC检测时254nmUV检测器下,却是A的吸收很强,B的几乎没有,
而且我也确定A和B的出峰位置没有颠倒,
真是郁闷啊,不知道以哪个检测为准
都是用的紫外检测 也有这个区别吗？
首先要确定A和B物质在紫外下的最大吸收分别是多少,其次是A和B的含量分别是多少.根据你的情况,可以大致分析出A物质在254nm下吸收强度远远大于B物质,而B物质的浓度远大于A物质.
在TLC下,A为微量物质,分辨精度不高,吸收几乎看不到,而B物质虽然吸收不大,单胜在浓度大,可以分辨.
在HPLC下,A物质在分离柱中被富集在一起,加上吸收大,出峰自然强,而B物质虽然浓度大,但吸收不强烈,因此出峰反而较弱.
建议做一下DAD,找一个矫正因子为1的波长来测HPLC.或者用示差折光检测器作分析可能比较省心.
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