作业帮色谱柱waters symmetry 没用多久就拖尾?怎么冲也不行,
来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：综合作业 时间：2024/05/20 02:19:23
色谱柱waters symmetry 没用多久就拖尾?怎么冲也不行,
是C18柱吗?原因大概有几种可能：1,上一次用了pH过大或过小的流动相,破坏了键合相,使峰形拖尾,这个原因不好补救.2,之前用了没有冲洗干净,解决办法是好好耐心的冲洗一下,实在不行可以选择倒冲.3,分析物是否与固定相上封尾不完全的硅羟基反应产生拖尾,这就与柱子本身无关了.
再问： 是C18柱，我用的流动相Ph值在2.0左右，约为2.1；最近一直在冲柱，反冲后柱压变大了，waters人员说我的管路和滤头不干净，可正冲时压力正常，如果是管路里带进来的异物正冲时就进去了，压力在反冲前就变大才对，您帮我分析一下原因，我觉得您说的前两个原因都有可能，谢谢帮助！
再答： pH2.0已经到了C18柱所能承受的最低极限了，如果是键合相被破坏那就不好说了。此外，您所用的流动相是什么呢？有盐吗？分析物又是什么？分析物如果不是蛋白，应该不会产生不可逆吸附。一般可以用甲醇水冲柱子（如果流动相用过盐水加热至60度，注意！不要超过60度！如果流动相没有用盐，水就不用加热了。），最好用一个循环的梯度来冲。（比如：1-30分钟流动相由5%甲醇+95%水线性变为95%甲醇+5%水，结束后再循环这个梯度。）如果还是不行，可以试试乙腈水。柱压问题如果排除管路堵塞后，可拆下柱头超声清洗。
再问： 是C18柱，我用的流动相Ph值在2.0左右，约为2.1；最近一直在冲柱，反冲后柱压变大了，waters人员说我的管路和滤头不干净，可正冲时压力正常，如果是管路里带进来的异物正冲时就进去了，压力在反冲前就变大才对，您帮我分析一下原因，我觉得您说的前两个原因都有可能，谢谢帮助！
再答： pH2.0已经到了C18柱所能承受的最低极限了，如果是键合相被破坏那就不好说了。此外，您所用的流动相是什么呢？有盐吗？分析物又是什么？分析物如果不是蛋白，应该不会产生不可逆吸附。一般可以用甲醇水冲柱子（如果流动相用过盐水加热至60度，注意！不要超过60度！如果流动相没有用盐，水就不用加热了。），最好用一个循环的梯度来冲。（比如：1-30分钟流动相由5%甲醇+95%水线性变为95%甲醇+5%水，结束后再循环这个梯度。）如果还是不行，可以试试乙腈水。柱压问题如果排除管路堵塞后，可拆下柱头超声清洗。