大片段基因(大约9k)回收时是不是需要专门的试剂盒呢?一般的试剂盒是不是不行呢?
来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/01 08:39:01
大片段基因(大约9k)回收时是不是需要专门的试剂盒呢?一般的试剂盒是不是不行呢?
普通的就可以,但是你的初始量一定要大,试剂盒对大片段的回收也是有一定限制的,我们用国产艾德来的胶回收试剂盒成功回收12K的质粒载体!
再问: 是这样的,我平时回收小片段的基因很顺利的,从没出现问题,可是最近一个月回收将近9k的基因却怎么也回收不好(回收后电泳检测带很弱),可是回收之前电泳检测带还是很亮的!这样我就怎么也想不通啊!所以怀疑到了是不是这个试剂盒不适合回收大片段的DNA?
再答: 正常回收率会随着片段的变大降低,片段的变小降低。回收后的产物只会比你回收的之前的少,因为有损失。还有就是,你回收之后是用溶解液溶的,体积一般会比之前的稍大。没啥想不通的,这个是正常损失。片段越大损失越大,我们一般大片段一般不进行回收后检测,直接进行下一步实验,回收这里没出现过问题。
再问: 是这样的,我平时回收小片段的基因很顺利的,从没出现问题,可是最近一个月回收将近9k的基因却怎么也回收不好(回收后电泳检测带很弱),可是回收之前电泳检测带还是很亮的!这样我就怎么也想不通啊!所以怀疑到了是不是这个试剂盒不适合回收大片段的DNA?
再答: 正常回收率会随着片段的变大降低,片段的变小降低。回收后的产物只会比你回收的之前的少,因为有损失。还有就是,你回收之后是用溶解液溶的,体积一般会比之前的稍大。没啥想不通的,这个是正常损失。片段越大损失越大,我们一般大片段一般不进行回收后检测,直接进行下一步实验,回收这里没出现过问题。
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