小量制备质粒DNA时发现质粒DNA不能被限制酶所切割,可能的原因是什么?

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/05/01 14:55:17

3）将离心管放入煮沸的水浴中,时间恰为40秒.
8）小心吸去上清液,将离心管倒置于一张纸巾上,以使所有液体流出.再将附于管壁的液滴除尽.除去上清的简便方法是用一次性使用的吸头与真空管道相连,轻缓抽吸,并用吸头接触液面.当液体从管中吸出时,尽可能使吸头远离核酸沉淀,然后继续用吸头通过抽真空除去附于管的液滴.
如果小量制备的DNA不被限制酶切开,很有可能在收获细菌的步骤3）或上述步骤8）未能很好地去除所有液体.这种情况下,可用酚：氯仿抽提DNA终产物,然后用乙醇重新沉淀DNA,通常,用5－10倍过量的酶（特别是并不昂贵的酶）在100-200μl 体积中进行消化,可以克服限制酶切割反应遇到切割反应遇到的困难.消化后,加0.1 体积3mol/L乙酸钠（pH5.2)和2倍体积乙醇沉淀DNA.

用相同的限制酶切割DNA分子和质粒后,用连接酶连接会有几种重组质粒形成? 切割质粒和含目的基因的外源DNA必须用同一种限制酶,这句话对吗? 影响质粒DNA提取纯度的原因? 质粒常被用作载体的原因是质粒上具有控制质粒DNA转移的基因目的基因和质粒为什么要用一种限制酶切割?限制酶和DNA连接酶作用的位点相同么? 当使用限制酶来获取目的基因时是否一定要用同种限制酶切割DNA和质粒来获取目的基因（2014•淮安模拟）图1表示某细菌的质粒中相关限制酶的切割位点，图2表示目的基因所在的DNA中相关限制酶的切割位点．请在基因工程中是否用一种限制酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理质粒DNA 质粒DNA制备与基因组DNA制备有哪些异同?质粒DNA的鉴定有哪些方法?基因载体应该具备哪些特点?为什么大肠杆菌质粒中的“控制质粒DNA转移的基因”,该基因的作用是什么? 质粒DNA提取时质粒为何会丢失? 阴离子交换树脂吸附交换质粒DNA的原理是什么