我的PCR产物电泳检测条带单一,为什么测序结果说模板杂?

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/29 15:34:03

答：PCR产物电泳检测的结果只是一个粗略的定性结果.对于与目的片段条带大小只相差几个碱基的非特异性PCR扩增产物是无法用肉眼区分开的.但是DNA测序反应敏感而客观,可以直接反应出模板本身的情况.需要强调的是,高质量的PCR产物才可能得到高质量的测序结果,如果您对PCR产物的纯度不很确定,希望您可以将PCR产物进行克隆处理,以确保得到好的测序结果.以下图为例：该反应的背景信号较高,不利于碱基的判读.
解决办法：改变PCR条件,重新扩增.或者可以将该PCR产物克隆到质粒中,初步筛选后进行单克隆测序.

PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? 转基因植物PCR检测,扩增条带比预期目的条带要大,对PCR扩增产物测序,结果与原序列比对同源性为60%,说明 PCR产物的电泳条带不够亮,为何?如何优化PCR反应体系 PCR电泳,为什么没有条带啊? 我构建的穿梭载体,连接好后进行双酶切和PCR两个途径的检测,结果酶切没有条带显示,而PCR确有目的条带! PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么二次PCR的产物电泳图观察,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾, 用RT-PCR检测目的基因表达差异,需将内参基因的电泳条带亮度调成一致. 胶回收：雀式pcr第一对pcr引物扩增后 ,产物电泳得到两条带,那么我该切哪一条啊? pcr电泳出现模糊团状条带是什么原因造成的 pcr电泳结果特别不清晰,条带很模糊连MARKER也看不清上样孔很亮,不加任何东西的上样孔都很亮