作业帮免疫荧光实验问题,设置两个对照和样本.对照1：非特异性对照,即样本孵育一抗时,以抗体稀释液代替一抗；对照2：阴性对照,没
来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/04/27 05:22:44
免疫荧光实验问题,
设置两个对照和样本.
对照1：非特异性对照,即样本孵育一抗时,以抗体稀释液代替一抗；
对照2：阴性对照,没有待检抗原的样本
结果如果对照1是假阳性,对照2是阴性,待检测样品是阳性,
设置两个对照和样本.
对照1：非特异性对照,即样本孵育一抗时,以抗体稀释液代替一抗；
对照2：阴性对照,没有待检抗原的样本
结果如果对照1是假阳性,对照2是阴性,待检测样品是阳性,
首先问你一下,你的假阳性结果和阳性结果有区别吗?对照1跟实验组相比就不能说明问题,你的抗原和二抗有结合,这是一种非特异性的结合,而且这种结果如果跟一抗的有无没有关系的话,那你的对照2就是没有意义的.我觉得这个实验不能说明你的结果是阳性的.
再问： 您好，又做了一次。 对照2也是阳性。我也不知道是不是阳性，反正和对照1、样本显示的结果都是一样的。。。。这样，怎样改进呢？
再答： 三个都是阳性明显这个实验某个重要的环节出现问题了，但你这种情况太特殊了，我不知道下面这种方法是不是适合，不过你实验都做成这样了，不如就死马当做活马医了。以前一个很有经验的老师说过，你做的如果是组织免疫的话，最好对照不要用PBS，就是你所谓的抗体稀释液，因为组织的性质跟ELISA板不同，有可吸收性，最好选用无关血清做对照，比如BSA这样的跟你的一抗确定不会反应的做对照。老实说用稀释液做对照会出现阴性比阳性结果明显这样的情况，虽然跟你的实验结果还是不同，因为你的阳性阴性是一致的，不过你可以试试这样，因为你的实验结果太奇怪了。还有你确定结果都是一样的吗
再问： 您好，又做了一次。 对照2也是阳性。我也不知道是不是阳性，反正和对照1、样本显示的结果都是一样的。。。。这样，怎样改进呢？
再答： 三个都是阳性明显这个实验某个重要的环节出现问题了，但你这种情况太特殊了，我不知道下面这种方法是不是适合，不过你实验都做成这样了，不如就死马当做活马医了。以前一个很有经验的老师说过，你做的如果是组织免疫的话，最好对照不要用PBS，就是你所谓的抗体稀释液，因为组织的性质跟ELISA板不同，有可吸收性，最好选用无关血清做对照，比如BSA这样的跟你的一抗确定不会反应的做对照。老实说用稀释液做对照会出现阴性比阳性结果明显这样的情况，虽然跟你的实验结果还是不同，因为你的阳性阴性是一致的，不过你可以试试这样，因为你的实验结果太奇怪了。还有你确定结果都是一样的吗