trizol法提取细胞的RNA,溶于DEPC水中,零下20度冰箱保存4天后,还能用来做RT吗?
来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/06/05 07:28:04
trizol法提取细胞的RNA,溶于DEPC水中,零下20度冰箱保存4天后,还能用来做RT吗?
如题~RNA的降解程度怎么样?没有重新测浓度,急等
如题~RNA的降解程度怎么样?没有重新测浓度,急等
降解大概20%左右吧.溶于dd水中是最好,DEPC促使降解更快.
刚提取的RNA应在检测之后迅速反转录之后把cDNA-20°保存.不过对于反转录来说,即使RNA在-20保存几个星期也是没什么大影响的.这个降解率不光跟当初溶解的水有关,还和你的RNA纯度有关.如果当初提取的时候有DNA或蛋白质的污染或本身就有部分降解,那么在保存过程中的降解率就会很高.
还有,只是为了左RT-PCR能有条带的话,那完全没问题,如果你坐的RT-PCR是为了构建文库的话,那就废了重新提取吧,那个质量就太差了,完全达不到要求的.
刚提取的RNA应在检测之后迅速反转录之后把cDNA-20°保存.不过对于反转录来说,即使RNA在-20保存几个星期也是没什么大影响的.这个降解率不光跟当初溶解的水有关,还和你的RNA纯度有关.如果当初提取的时候有DNA或蛋白质的污染或本身就有部分降解,那么在保存过程中的降解率就会很高.
还有,只是为了左RT-PCR能有条带的话,那完全没问题,如果你坐的RT-PCR是为了构建文库的话,那就废了重新提取吧,那个质量就太差了,完全达不到要求的.
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