为什么我用BCA蛋白试剂盒测定蛋白浓度时,测得的浓度和我估计的浓度相差那么多呢?

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：综合作业时间：2024/04/30 10:39:50

为什么我用BCA蛋白试剂盒测定蛋白浓度时,测得的浓度和我估计的浓度相差那么多呢?
起先配置的6mg/ml,然后稀释3倍,浓度在2mg/ml左右,但是测得只有0.5mg/ml,这是什么原因呢?

配置的BSA?是称取的固体配置的吗?
可能是配置的时候出现了误差,配置不精确.
BCA 受反应温度和反应时间影响较大,可能是反应时间还不够
再问：我的错没表达清楚，是我的样品测出来的和我估计的浓度相差太大，标准曲线还是在0.99以上的
再答：建议你先用SDS-PAGE的方法大致确认你的样品浓度
比如使用确定浓度的BSA(1mg/ml)和你的样品(Xmg/ml)保持同一上样量一起跑，如果条带跑出来差不多大小，那你的样品就应该在1mg/ml左右。
然后再去用BCA检测浓度，如果测出来和估计值偏差较大，那么就证明BCA并不适合检测该样品。
可以换用Bradford法或者Lowry法检测。

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