已知某肽基因全长120bp.拟通过DNA重组技术构建含6×his标签的重组融合蛋白...

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/20 10:00:06

已知某肽基因全长120bp.拟通过DNA重组技术构建含6×his标签的重组融合蛋白...
已知某肽基因全长120bp.拟通过DNA重组技术构建含6×his标签的重组融合蛋白的基因工程大肠杆菌,得到具有细胞增值活性的蛋白产物最终纯度不小于98％,请根据相关原则设计具体的实验方案和技术路线

根据目的基因序列设计引物；PCR目的基因片段；跑胶,产物回收,纯化；连接T载体（如PMD18t）；转化宿主菌；筛选单克隆；测序；大量培养,提取重组质粒；酶切,电泳,回收,纯化,连接表达载体（如pET系列）,转化；筛选单克隆；酶切鉴定,测序；诱导表达；裂解细胞；过Ni亲和层析；注意：可溶蛋白和包涵体处理根据实验目的是不一样的.若对蛋白纯度不满意可以综合使用其他分离技术,如离子交换树脂等.如his标签影响蛋白活性可切除,此外如果目标蛋白活性较低或失活,可以共表达一些其他蛋白（如分子伴侣等）.若蛋白活性需要糖基化则应该考虑真核表达系统.总之,没有一种表达体系能够完美表达每一种蛋白,根据目的蛋白的结构（是否有稀有密码子、二硫键、糖基化、膜蛋白、复杂折叠、其他翻译后修饰系统）来选择合适的系统,才能达到理想的目的.

6*his标签作用在基因工程中,重组蛋白通才以融合蛋白的形式表达,其中常用一种6*his标签.目的是什么?极其原理? 基因重组技术人与蟒蛇基因重组融合培育出蛇人具体的方法说谢谢! 诱变育种技术,原生质体融合技术,DNA重组技术三种育种方法的优缺点已知大鼠脑组织中蛋白质的DNA序列,如何设计实验,克隆大鼠的基因并得到重组蛋白重组蛋白的检测通过SDS-PAGE中重组蛋白在蛋白MARKER的位置判断蛋白的表达情况和通过用标签抗体检测重组蛋白判基因表达载体的构建为什么也可以叫重组DNA?高中生物 DNA重组技术是怎样的原理 , 利用体外重组技术将某特定的基因或DNA序列插入载体分子的操作过程是什么? 重组DNA技术中最常使用的运载目的基因的载体如果想把水母发光的基因给鱼,利用DNA重组技术,受体细胞是什麽转基因与重组DNA技术为什么载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞?