流式抗体如何选择?现在有各种荧光标记的抗体,对流式抗体进行选择时应注意哪些问题?

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/30 00:10:06

流式抗体如何选择?
现在有各种荧光标记的抗体,对流式抗体进行选择时应注意哪些问题?

第一看清楚抗的是你的目标蛋白质没错,目标蛋白的物种不要搞错了,有些抗体对好几个物种的目标蛋白有反应,对你的实验有没有影响.
第二抗体的物种是小鼠,大鼠,兔子还是什么.虽然现在荧光都标记好了,一般不需要二抗.但最好还是选择你有匹配二抗的一抗,以备不时之需.如果抗体还能够做荧光染色啊,western blot啊用途多了更好.
第三荧光的颜色选择一是你的流式仪一定要能读,二是跟你需要counterstain的其他流式抗体错开频率.
第四抗体的球蛋白亚型.因为要根据这个选择isotype对照用抗体.其实严格来说不光亚型一样,浓度也要一样,每个抗体分子携带的荧光分子数量也要一样才行.最好是一个isotype你的好几个抗体都能用,就省了事了.
第五到底能测试多少样品.有些产品介绍没说清楚,可以根据推荐的浓度计算一下.一是这样才看出价格高低,二是根据自己需要选择大支还是小支.买多了过期也是浪费.
当然也可以看看他们的克隆编号--有些文献会讨论某目标蛋白的各种抗体的特异性哪个好哪个坏,这都是使用者的经验.但一般买抗体没有人这么小心这么麻烦啦.
你还可以看制作抗体所用的抗原是什么,有的是肿瘤组织提取液,有的是重组蛋白,有的是肽链片断.选用哪个跟你的实验用途有关.有些蛋白质有很多亚型,也要注意是否测试过跟那些亚型起反应.
一个非常重要的忘记说,就是单抗还是多抗.也要根据实验性质选择.搜到一篇不错的文章谈这个问题你看下吧.

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