作业帮 > 生物 > 作业

细胞培养液传代之前是好的,并且是每天换液,但一传代细胞第二天就浑浊变黄了,

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/04/29 03:14:51
细胞培养液传代之前是好的,并且是每天换液,但一传代细胞第二天就浑浊变黄了,
变黄是酸了,应该加大用量,或者增加一点缓冲剂浓度
浑浊,没有污染吧?或者传代的时候破裂细胞太多
再问: 但越往后,细胞形态越不行,并且镜下未见明显污染物,一直纳闷
再答: 密度再小一点。是肿瘤细胞么?有的可以1:10传代 什么细胞?我们以前养SP2/0的时候,培养基要再添加HEPES,调PH后再过滤的,防止过酸 还有CO2的浓度,换个培养箱,有时候指示不准确
再问: 恩,是大肠癌细胞(ct26),我们用的100ml培养瓶,一般一传三,培养液到从来没有调过PH,如何调试哇,实验室也没有做过,要用滴定管加盐酸或氢氧化钠调吗,最适宜的ph是多少哇,还有pbs要调吗,我们是买的pbs粉冲的
再答: 一般不用调的。 肿瘤细胞一传三肯定不够,至少1传5以上。 买的pbs粉不用调。培养基在过滤之前添加HEPES (10-50 mM),再用Tris或NaOH调PH至 7.2- 7.4,然后过滤。这个主要是增加其缓冲能力,防止溶液过酸。