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用Pfu酶和Taq在相同条件下进行PCR,结果是Pfu酶能够扩增到目的条带,而Taq酶没有,是为什么呢?

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/19 05:34:47
用Pfu酶和Taq在相同条件下进行PCR,结果是Pfu酶能够扩增到目的条带,而Taq酶没有,是为什么呢?
提取出的DNA用TE溶解后加了RNase,但是RNase对PCR没有太大的影响啊
用的是两种酶 一个有一个没有不是很正常的么.要不然为啥是两种酶.
再问: 因为后来决定做TA克隆,但是之前一直用的Pfu酶,后来Taq酶P不出来,用Pfu来作对照,发现Taq酶P出来,而且是Taq能P出来,Pfu酶P不出来,跟别人出现的情况差异太大了
再答: 哪种酶能P出来对你的实验应该没有影响吧 也许是那管在室温放的久了点 一般就是一种酶P不出来就换另一种试一下 你是涂板之后菌P用Pfu没条带 还是TA克隆都是用PFU在做哦。。。
再问: 我是在做TA克隆之前,P目的条带,因为Pfu酶P出来的没有加A,虽说有加A的方法,但是感觉效果不会很好,老师也要我尽量不要用太多的操作步骤。而且,关键是别人都是Taq酶能P出来,而Pfu酶P不出来,我的正好反了,貌似没人出现过这种情况,分析半天找不出原因
再答: P出来就可以了 何必纠结原因呢 只要测序啥的对了 不就皆大欢喜了 在试剂都没有问题的情况下 这种事本来就找不到原因的 也许过几天你P又是不一样的结果