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还原糖滴定时需要注意的事项

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/02 02:06:07
还原糖滴定时需要注意的事项
注意事项
(1)本法是根据一定量的碱性酒石酸铜溶液(Cu2+量固定)消耗的样液量来计算样液中还原糖含量,反应体系中Cu2+的含量是定量的基础,所以在样品处理时,不能用铜盐作为澄清剂,以免样液中引入Cu2+,得到错误的结果.
(2)碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存,用时才混合,否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀,使试剂有效浓度降低.
(3)滴定必须是在沸腾条件下进行,其原因一是加快还原糖与Cu2+的反应速度;二是亚甲基蓝的变色反应是可逆的,还原型的亚甲基蓝遇空气中的氧时会再被氧化为氧化型.此外,氧化亚铜也极不稳定,易被空气中的氧所氧化.保持反应液沸腾可防止空气进入,避免亚甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加消耗量.
(4)滴定时不能随意摇动锥形瓶,更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定,以防止空气进入反应溶液中.
(5)样品溶液应预测,其目的:一是本法对样品溶液中还原糖浓度有一定要求(0.1%左右),测定时样品溶液的消耗体积应与标定葡萄糖标准溶液时消耗的体积相近,通过预测可了解样品溶液浓度是否合适,浓度过大或过小应加以调整,使预测时消耗样液量在10ml左右;二是通过预测可以知道样液大概消耗量,以便在正式测定时,预先加入比实际用量少1ml左右的样液,只留下1ml左右样液在继续滴定时加入,以保证在1分钟之内完成继续滴定工作,提高测定的准确度.
(6)必须严格控制反应液的体积,标定和测定时消耗的体积应接近,使反应体系碱度一致.热原一般采用800W电炉,电炉温度恒定后才能加热,热原强度应控制在使反应液在两分钟内沸腾,且应保持一致;否则加热至沸腾所需时间就会不同,引起蒸发量不同,使反应液碱度发生变化,从而引入误差.沸腾时间和滴定速度对结果影响也较大,一般沸腾时间短,消耗糖液多,反之,消耗糖液少.滴定速度过快,消耗糖量多,反之,消耗糖量少.因此,测定时应严格控制上述条件,力求一致.平行试验的样液消耗量相差不应超过0.1ml.