单引物PCR对照的原理

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/05/16 14:02:46

单引物PCR对照的原理
为什么有时候做PCR要做单引物扩增对照?和阴性对照的差异是什么?有什么意义?单引物扩增有条带和没条带分别说明啥?应该要怎样才是对的?
我做了一次PCR..单引物双引物和阴性对照都做了..其中一个单引物的条带和双引物的条带一样..另一个单引物没有条带..阴性对照也无条带..这说明什么问题呢?是我的引物设计有问题吗?那个条带是我的目标产物吗?

你理解的很对,那个条带不大可能是你的目标产物
不过一般单引物对照很少有人做的
因为设计引物时,很多时候你是不知道基因组或者模板中DNA都是什么,有的时候单个引物就能扩增出条带,但这却不是你想要的,所以做单引物对照,如果跟双引物结果一样,说明另一个引物没起作用,这肯定偏离你的实验设计
阴性对照是检测整个反应体系中是否存在核酸污染的.如果你没有加入模板,是不应该出现条带的；如果出现了,则说明反应体系中,酶、buffer、水等里面混有其它DNA,必须查明原因后更换试剂

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