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帮我看看我的western blot条带吧.

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/03/29 19:41:40
帮我看看我的western blot条带吧.
我跑的条带每次旁边都有那种稀奇古怪的阴影,有没有人知道这是咋回事啊.见图.
可能是一抗和二抗浓度过高了,稀释一下看看吧
再问: 稀释了以后条带就出不来了啊。。。
再答: 二抗的浓度呢,有没有稀释,还有注意二抗与一抗的种属关系,必须是相抗的,封闭时间要延长,且摇床的速度不宜过快
再问: 二抗浓度用到了1:20000,种属当然是想抗的啊,要不然怎么会有条带呢。。。封闭快2个小时了。。。摇床也还好啊。。。
再答: 能说一下你的封闭液是5%的脱脂奶粉吗,你看一下有的二抗是不能用脱脂奶粉的,比如生物化素就得用BSA封闭,还有封闭的时间再延长,膜严格按照10min/次,洗三次,我前期也出现过,结果把一抗,二抗都稀释了,然后封闭时间多延长了1h,结果特异性条带就去除了,好好加油,相信你一定能成功!