PCR为什么会扩增出同源序列

直接发送给我,我帮你设计.

正向引物：5'CTTCGAAATTC反向引物：5'CCGATCGGGAGA(TCTCCCGATCGG的反向互补序列）当然,这对引物有些短,其实真正设计时上下游引物的序列中都可包含部分基因1的序列,以平

因为DNA聚合时需要3‘OH,这个只能由引物提供（没原因,就因为是那样）.这个引物是一小段RNA,引物绝对是RNA,而不是DNA.看看DNA复制需要什么酶就知道了,需要依赖DNA的RNA聚合酶（DDR

你是说PCR产物电泳出现多带或产物没序后有多种序列?总之,有可能是引物退火温度太低,错配的结果.建议提高退火温度或换引物.

给楼主找了个PCR技术指导,希望有点帮助http://bbs.biogo.net/read.php?tid=56483&keyword=PCR%BC%BC%CA%F5

什么跟什么说的太不清楚饿了只要你需要的那段序列是对的不就行了嘛跟引物序列有啥关系毕竟大部分的PCR引物设计都是在需要的序列两端隔一段距离而且如果你测序是拿PCR引物测的话那前面的几十个碱基都是测不准的

不对,任何体细胞都有性染色体,因为它们都是从同一受精卵增殖分化而来的.PCR需要目的基因做模板才可大量复制.

PCR扩增一般只是扩增上下游两条引物之间的序列.不是.扩增一段序列,就是一段DNA双链,需要两条引物,分别和DNA双链的两条单链的3'端结合,然后扩增出两条引物间的序列.你需要详细了解下PCR的原理,

FPrimer:5'-TTGTAAAAAAATTAAATTAA-3'RPrimer:5'-CATATTTTAATTAATATTTC-3'你这个序列AT含量太高,尤其是5'端A有7个连续重复,引物本身很

上游：5ggaattcatgtttagtttgaaaaaaac3下游：5gggttcgaattagacattgccaacatatt3你要的并不是鉴定引物,而是扩增引物根本不用软件

试试吧.退火温度低一些50左右

把这段基因输入设计软件里,调节引物位置,使变性温度在94度,退火温度=Tm-（5到10度）延伸温度72度左右,满足这些条件基本就可以了,当然还要根据实际情况多次实验得到最佳引物.如果你要扩增整个的基因

引物是核算复制的起点片段,体内是RNA,PCR技术使用的是DNA片段,将来成为扩增之后的DNA组成部分,位于其一端,引物的量决定扩增所达到的DNA量再问：假如我要研究DNA中的一段，选择引物也是可以的

pcr扩增出来就是目的基因.假设这是一段基因（两条链一个道理我就只表示一条了）--------------+————————=-------------------中间是目的基因,=和+表示它的两端,

前提：你的这条序列是5‘--3’的吧正向引物5‘--3’：TGCAACTACGTCCAC反向引物5‘--3’：TCGGACAAGACGTGC再问：能说说为什么吗？再答：DNA是双链的，引物结合于一条链

可能有很多原因,最常见的原因是1.模板不干净,2.引物设计不当,3.退火温度过高,等等

上游引物：GAATTCacgcgcaagattagg（后面可以继续加几个碱基,用PRIMER5.0看一下,引物设计多少个碱基合适,每个基因序列不同.我用TOYOBO的KODPLUS的话,就一般引物设计

这个问题很简单,扩增序列应该称为目的基因,目的基因一般都上万bp,从两头开始当然不合适.PCR扩增只能扩增出上下游引物之间的序列,因为只有引物之间的DNA双链是解链状态的.你的问题说明你对基础知识掌握

PCR扩增出目的片段,需要自己提取模板,可以是RNA,或者DNA.引物会结合模板,如果特异性不够好,比如引物与模板的其他位点结合,在PCR过程中就会产生很多不同条带.

我说说我的理解,仅供参考：你本来的意图,是通过载体线性化后,外源基因与基因组同源位点的双交换,将其整合入基因组中,对吗?如果说是整个环状质粒导入基因组,从理论上来说是有可能的,单酶切就可以了,而且概率