作业帮蛋白电泳前菌液怎么提取
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/06 11:34:05
我以前提的蛋白用的是TCA-丙酮法,可是跑了好几次,电压都升不上去,谷友们说可能是盐离子浓度过高,但是我用超滤的方法试了,电压还是升不上去,我只有重提蛋白,（我还是想用TCA-丙酮法）但我不知大家在用
阴极电泳漆：双组份：色浆《黑色》和乳液《乳白色》通常色浆比乳液1:3.1:4.单组份：分固体含量一般有45%,58%,70%.
要看你原料用的是双组分的还是单组分的.后者的话只能加高温度用来去掉光泽,但是那样的话会影响成品工件的附着力,盐雾试验.双组分的话我建议你多加色浆的比例,那样的话就不会影响工件的质量.其他工艺方面的操作
有没有可能,有环状超螺旋DNA、开环DNA与变性的线型DNA三种空间构想,导致跑出3条带
跑的距离在一行证明含有一样的基因,图中父母该性状为杂合子,胎儿和患儿没有一样的基因,即不含致病基因,一定不会患病
点个预染marker就看到了
首先除了氨基酸序列以外其它信息不要包括检查氨基酸序列,看是否有U存在.
1.盐酸胍能使蛋白变性,溶解蛋白.2.95%可以使蛋白沉淀析出.
以醋酸纤维薄膜为支持物,浸入ph8.6的缓冲液后吸去多余液体.将微量血清点于膜上,经电泳后,将薄膜置染色液中使蛋白质固定并染色,洗去多于染料.将膜条烘干,再将其用透明液进行透明处理.用光密度计或凝胶成
用这个方法复溶蛋白时很难完全溶解掉,样品处理很是个问题,应该是蛋白浓度不高.我做过类似的也是用这个方法,电泳出条带很浅甚至没有,很郁闷.再问：那你后来是怎么解决这个问题的呢？是bufferB溶解的时候
可能有几个原因：一：上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看（你所用的缓冲液是不是很久了?）二：如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的三：不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是
分离细胞膜蛋白的方法：1冰上刮下细胞后将细胞溶于有蛋白酶抑制剂的缓冲液A中,于室温与液氮罐中反复冻融2次.25000转4度离心,驱除核及未裂解的细胞.3取上清12000转4度离心10分钟取沉淀溶于有蛋
Tris-Gly与TAE、TBE两者的离子强度不同,用来跑DNA可能不行三磷酸腺苷(站内联系TA)补充,你跑native或者EMSA胶一类的,可以用TBE跑蛋白或者蛋白－核酸复合体yaoyl0679(
①包涵体加入SDS-PAGE上样品缓冲液后,和缓冲液里的SDS及DTT一起加热会溶解.②如果是为了检测表达产物是可溶还是包涵体,在细胞破碎后离心,将上清及沉淀分别进行电泳,如果目的条带在上清中,则为可
可以依照以下几个线索分析：1,薄膜本身的质量问题（涂层不均匀等）,2,点样技术问题,3,电压电流控制问题,4,样品本身是否有降解、污染；5,实验过程其他可能影响结果的问题,如平衡时间、浸泡时间、染脱色
先是用PEG胶电泳分离不同分子量的蛋白条带,然后转移到膜上的,才能看的呀,可以用丽春红染色液染色后看,当然还可以用考马斯亮蓝进行胶体染色看血清蛋白是否全部转移到膜上.
胶配的有问题
marker能看到吗?marker很清楚,电泳就没问题.说明没有DNA.可能提取失败,沉淀也许是盐.测测浓度吧,应该很低.看看提取程序是不是有问题.
后加电泳液的话液体溢过胶体时的流动容易把蛋白质样本冲出其所在的井.而且这样做容易在胶体四周留下液体无法进入的空隙,可能影响电泳效果.应该是这样
很正常可能是DNA