荧光定量pcr引物设计原则 跨越内含子

这个不同的基因Taqman的探针不一样,它不是通用的,是专一性的,是某个基因的某段序列.然后你选一段小的位置来做为探针,两端分别加上发光基团与淬灭基团,正常情况下他们不发出信号,在PCR扩增的时候他就

完全可以,PCR长度从50bp到数百都可以,不止局限于150-300个碱基对.楼上说的有道理,但是有一点要注意,最好计算一下扩增片段的Tm值,这样做溶解曲线的时候,光有一个峰还不够,而且得到的TM和你

请用primerexpress设计就行.你想去找非常保守的区域设计引物?可以,那你把这个物种的所有亚种的此段DNA序列做一个保守型分析就行.一般来说clustalX就可以了.再问：ClustalX排列

不用那么复杂网上那都是扯淡的主要是这么几点注意的：1.碱基组成,GC的含量2.引物长度3.不能有反向重复和自身互补序列4.Tm值5.3端最好为G或C等等设计时最好用软件弄一下不用面面俱到没有太大问题就

参照以下real-timePCR引物设计原则：1.最好位于编码区5’端的300-400bp区域内,可以用DNAman,Alignment软件看看结果.2.产物不能形成二级结构（自由能小于58.61KJ

实时定量的引物设计要求比较高,可以按普通引物设计的方法来做,但是设计时要注意扩增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之间.同时要保证这对引物有绝对的特异性,因为要是产生非特异性扩增的话,就不能

有的可以通用,但是大多数的时候不能,需要重新设计,我公司可以带你设计引物,如果在我公司订购试剂,可以免费设计,南京骥骜生物,电话：025-84865584,

1纳摩尔（nmol）=1000皮摩尔（pmol）9.96nmol/X=100pmol/ul解出X=99.6ul答：加入100微升vddH20PS.一般我们买回引物,管它那么多,都加100微升水用着,没

建议你还是选择CDS区不一样的地方设计引物吧,这样可以避免交叉污染引起的非特异扩增,扩增的序列长度不一定要一样,每个引物你最好设计两三对,然后做一个相对定量看看不同引物的扩增效率,选择比较好的两对引物

楼主说的是扩增子,即两引物目标位点之间的序列长度.PCR过程中,扩增就跟修路一样,越长越费工.在能够保证特异性的情况下,当然是越短越有效率,100-200bp就是综合两方面的考虑而建议的最佳扩增子长度

博凌科为-为你如果lz确实已经确定该基因SNP位点以及突变型,你可以选择荧光定量PCR进行检测,检测方法是：1、探针设计在突变位置,有几个突变点设计几个（不同突变型需要不同的荧光标记：例如,野生型探针

使用引物设计软件,如果可以最好找公司设计合成,这样有保证.再问：老师要我们自己设计啦···杯具··再答：挺有难度，到网站上找一些设计原则看看。再问：谢谢啦，已经搞定啦··

如果你测定的基因序列未知,可以用同源基因或者别的物种的同类基因序列来设计引物,进行PCR,看看是否能够扩增出产物,并对产物进行确认,判断扩增的特异性.如果确认无误,就可以进行荧光定量PCR.再问：我想

貌似我做的时候引物没有考虑那么多似乎只要是在保守序列里的就可以所以引物会有很多组组合.我一直以来跑PCR后电泳也没发现带一般是摸版或者引物的问题几率比较大

最好不要有引物二聚体的产生

选取目标片段长度在80-250bp的引物,在回头BLAST,特异性良好的话就可以了,一般我会多设计几个,选取最好的那个~

一般的RT-PCR引物是不能用来做是实时荧光定量的的引物的,但是你可以设计出兼顾二者的引物,除了要注意一般引物设计的原则外,愚见认为还要注意下两个问题：

阅微基因是由国内外多名从事生命科学研究的技术人员创建,致力于基因分型和基因检测技术研究,并基于自身的研究为科研用户提供相关的技术服务.同时还生产了若干优秀的分子生物学产品,为科研工作者提供有力的工具.

你是直接用primer5设计的引物吗?有时候时会遇到你说的问题,你可以在软件设计出来的基础上,手动的把你的引物移动几个碱基,可以减少一些二聚体或错配,而且,软件给出来的这些结果都只是计算值,你实际应用

先把该全长基因测序,然后按照测序结果设计完全匹配的引物然后将设计的多个候选引物与ncbi中该物种的其它基因或者基因组进行比对,选择特异性最好的去做realtimePCR