目的基因CDS扩不出来

理论上来讲如果是同一物种的基因,例如将玉米基因转入玉米中,最好是选用基因组DNA.当然用cDNA也不是不可以,但是存在这样的情况,就是转cDNA并没有产生表型改变而转基因组会发生表型改变.如果是不同种

只能两头设计你不知道基因名字么实在不行拿序列去BLAST上比对下也能知道它前后是啥啦

可能基因片段在扩增过程中出现突变可能启动子不够强可能受体细胞缺少表达该基因所需的原件

一般有两种方法,一是用目的基因的特异性引物以重组质粒为模板,进行PCR扩增.看能否出现目的基因的扩增产物.还有一种是将纯化的质粒进行酶切,因为目的基因连接到载体质粒上时两边都带有人工添加的酶切位点,只

基因文库可以构建所需的目的基因,并且不含有其他基因.一般母目的基因都很小,直接提取的话会含有很多其他片段的基因,难以将他们分离开来

基因文库技术分离目的基因所谓文库(1ibrary)是指一种全体的集合.基因文库(genelibrary)则是指某一生物类型全部基因的集合.这种集合是以重组体形式出现.某生物DNA片段群体与载体分子重组

目的基因和标记（抗药）基因处于同一个质粒上.一般所用的质粒这两个基因由不同的启动子驱动.抗药基因都是持续表达,所以只有含有质粒的细菌才能存活并被扩增.而目的基因则根据情况而定.如果只是用来扩增,而不需

转基因一般用质粒为载体质粒导入酵母菌后在细胞质中酵母基因在细胞核中不会相互干扰

要看你的反应体系是不是有问题,是不是药品换了或者是污染了,把反应体系中的每一种药品都要进行验证,看是否有问题,也有可能是引物用的时间长了.还有PCR程序有没有问题,PCR仪的问题等.再问：谢谢哈，可能

问题有可能如下：1）模板制备有问题.你可以用普通PCR扩增,然后电泳确定是不是模板有问题?2）引物问题：引物设计的好与否,对Realtime结果至关重要!可以用普通PCR确定你的引物扩增效率如何?模板

筛选出来的是含目的基因的细胞啊.筛出来干什么,要看研究目的了.这步操作在体外.单细胞的生物,比如大肠杆菌,这点没什么疑问.如果是动植物,是可以进行细胞培养的,植物细胞可以再生成植株,动物的话可以对胚胎

目的基因应为所需的基因完整片段,而基因探针可以是该目的基因中的一个小片段再问：这样不是只获得目的基因的一条单链吗再答：DNA分子的结构是双螺旋结构，且由于碱基互补配对所形成的DNA双链结构，也就是说知

翻译不出来.首先在转录水平上能转录出全场mRNA其次但是到翻译水平是,核糖体会沿着mRNA从3‘端向5’端滑动,遇到第一个atg开始翻译,此后遇到终止子停止翻译.因此你的蛋白很难被翻译出来.但是,终止

检测到目的基因导入了并不一定说就能表达出来,这里面还有很多其他的原因会导致基因是否表达,所以一般要先检验目的基因是否导入之后（如果导入了但又没表达,这时可以研究是其他原因了）,再去检验是否表达.这是一

为什么要建血库?直接从人体内抽不行吗?当然是储备啦.

不行,克隆是复制一个个体而构建表达载体是将目的基因接在质粒上.

因为加入标记基因的目的是为了选择出符合目的的产物,若是目的基因产物同样具有被选择性,那也是可以作为标记基因的....

这个技术叫GeneSynthesis.现在已经可以商业化合成了,只要提供一段序列（可以任意设计）,厂家就可以照样合成出来.不需要进行任何PCR.这里给个厂家的连接

第一个问题基因探针一般是一小段DNA片段或RNA片段也可以是全部的DNA寻找目的基因正是为了大量获取目的基因毕竟人工合成比较复杂繁琐基因探针一般是已知目的基因部分序列或者是用mRNA逆转录得到的第二个

我不了解你的实际情况,我给你几条建议：1.可能是内参引物有问题2.你扩增内参基因的PCR条件设计可能有问题,如Tm3.你用的是一块胶吗?加核酸染料了吗?