BL21产气产酸吗?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 11:11:07
表达型大肠杆菌BL21(DE3)PLySs感受态细胞转化培养

BL21(DE3)PLySs,转化后37℃慢摇45-60min吧,不加任何抗生素.pET28也没什么特殊tag,没影响的,就是很容易出包涵体的.

大肠杆菌bl21的特性

BL21是常用的表达菌株,一般配合以强表达载体来进行目的基因的强表达.BL21(DE3)pLysS对λDE3(1)是溶源性的.λDE3含有T7噬菌体基因I,编码的T7RNA聚合酶受lacUV5启动子的

感受态细胞有沉淀BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度

一般保存是在-80摄氏度,-20度可以放一段时间,但不能太长.底部有沉淀正常,甘油只是悬浮菌体,而不能溶解,久了就会沉淀下来!转化质粒失败是其他原因,最大可能性是感受态无活性,建议重做感受态,及做即用

对比大肠杆菌 DH5a 与 BL21的异同点,观察两者在生长形态上的差别.

BL21是蛋白酶缺陷株,表达蛋白后不会被降解~所以一般来表达~还有就是BL21生长要比DH5a快~DH5a则是复制会比较稳定,所以常常用来转化智力、制作核酸疫苗~麻烦采纳,谢谢!

使用T7启动子,BL21(DE3)菌株,加入的IPTG的终浓度要到多大才能起到诱导的作用

最佳浓度是1mM,但是这样非常容易形成包涵体.如果包涵体可以用的话,比如做抗体,那么当然是蛋白越多越好,不过大多数时候我们需要蛋白的可溶性表达,所以这个浓度也需要摸索.如果你的蛋白必须是可溶性表达的话